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SnapDigest 限制性内切酶反应体系
SnapDigest 快速限制性内切酶采用优化缓冲体系设计，多数酶可在 5–15 分钟内完成 DNA 酶切反应。
在室温下按顺序混合以下反应组分：
| 组分 | 质粒 DNA | PCR 产物 | 基因组 DNA（gDNA） |
|---|---|---|---|
| 无核酸酶水 | 15 µL | 17 µL | 30 µL |
| 10X SnapDigest 缓冲液或 10X SnapDigest 绿色缓冲液 | 2 µL | 2 µL | 5 µL |
| DNA | 2 µL（最多 1 µg） | 10 µL（~0.2 µg） | 10 µL（5 µg） |
| SnapDigest 内切酶 | 1 µL | 1 µL | 5 µL |
| 总体积 | 20 μL | 30 μL | 50 μL |
实验提示：
- SnapDigest 限制性内切酶建议最后加入反应体系。
- 建议总酶体积不超过反应体系总体积的10%。
- 双酶切实验应优先选择兼容缓冲体系。
- 使用 SnapDigest 绿色缓冲液时，酶切产物可直接用于凝胶电泳。
SnapDigest 限制性内切酶实验优化建议
优化双酶切、PCR产物酶切及下游实验兼容性，帮助提升DNA酶切实验稳定性与重复性。
双酶切建议
SnapDigest 通用缓冲体系支持多种限制性内切酶组合进行双酶切或多酶反应。建议优先选择兼容缓冲体系，并控制总酶体积不超过反应体系的10%。
PCR 产物酶切建议
未纯化 PCR 产物中的盐离子、dNTP 或聚合酶可能影响酶切效率。建议 PCR 产物体积不超过总反应体系的1/3，必要时进行纯化后再进行酶切。
热失活与下游实验
部分 SnapDigest 限制性内切酶可通过热失活终止反应，便于直接进行连接、PCR、电泳等下游实验。具体热失活条件请参考产品说明书或反应条件表。
实验优化建议
- 建议 DNA 终浓度控制在20–100 ng/μL
- 最终甘油浓度建议低于5%
- 限制性内切酶建议最后加入
- 避免长时间或过夜酶切
SnapDigest 限制性内切酶反应条件
未找到与您输入条件相匹配的记录
| 货号 | SnapDigest 内切酶 | 反应温度 | 使用 1 µL SnapDigest 酶的消化时间（分钟） | 热灭活 | ||
|---|---|---|---|---|---|---|
| 质粒 DNA, 1 µg/20 µL |
PCR 产物, ~0.2 µg/30 µL |
基因组 DNA, 1 µg/10 µL |
||||
| FB02243005 | SnapDigest AatII | 37°C | 20 | 15 | 15 | 80°C, 5 分钟 |
| FB02240010 | SnapDigest Acc65I | 37°C | 5 | 5 | 5 | 65°C, 5 分钟 |
| FB02220020 | SnapDigest Alw44I | 37°C | 60 | 10 | 5 | 80°C, 5 分钟 |
| FB02218030 | SnapDigest ApaI | 37°C | 5 | 20 | 10 | 65°C, 5 分钟 |
| FB02200080 | SnapDigest BamHI | 37°C | 5 | 5 | 5 | 80°C, 5 分钟 |
| FB02248005 | SnapDigest BcuI | 37°C | 5 | 5 | 5 | 否 (苯酚/氯仿提取，柱法纯化) |
| FB02221010 | SnapDigest BglII | 37°C | 20 | 30 | 20 | 否 (苯酚/氯仿提取，柱法纯化) |
| FB02244002 | SnapDigest BpiI | 37°C | 5 | 5 | 5 | 65°C, 10 分钟 |
| FB02250002 | SnapDigest BshTI | 37°C | 5 | 5 | 5 | 80°C, 5 分钟 |
| FB02201020 | SnapDigest Bsp119I | 37°C | 5 | 5 | 5 | 80°C, 5 分钟 |
| FB02241010 | SnapDigest Bsp1407I | 37°C | 5 | 5 | 5 | 80°C, 10 分钟 |
| FB02238015 | SnapDigest BspTI | 37°C | 5 | 5 | 5 | 否 (苯酚/氯仿提取，柱法纯化) |
| FB02222005 | SnapDigest Bsu15I | 37°C | 5 | 5 | 5 | 65°C, 15 分钟 |
| FB02236002 | SnapDigest CpoI | 37°C | 5 | 5 | 5 | 65°C, 5 分钟 |
| FB02252010 | SnapDigest DpnI | 37°C | 5 | N/A | 10 | 80°C, 5 分钟 |
| FB02223010 | SnapDigest Eam1105I | 37°C | 5 | 5 | 5 | 65°C, 5 分钟 |
| FB02228005 | SnapDigest Eco105I | 37°C | 5 | 5 | 5 | 65°C, 5 分钟 |
| FB02229010 | SnapDigest Eco147I | 37°C | 5 | 5 | 5 | 80°C, 10 分钟 |
| FB02224010 | SnapDigest Eco31I | 37°C | 5 | 5 | 5 | 65°C, 5 分钟 |
| FB02203040 | SnapDigest Eco32I | 37°C | 5 | 5 | 5 | 否 (苯酚/氯仿提取，柱法纯化) |
| FB02225002 | SnapDigest Eco47III | 37°C | 5 | 5 | 5 | 65°C, 5 分钟 |
| FB02226020 | SnapDigest Eco72I | 37°C | 5 | 5 | 5 | 80°C, 10 分钟 |
| FB02227005 | SnapDigest Eco81I | 37°C | 5 | 5 | 5 | 80°C, 10 分钟 |
| FB02204020 | SnapDigest Eco91I | 37°C | 5 | 5 | 5 | 65°C, 10 分钟 |
| FB02202080 | SnapDigest EcoRI | 37°C | 15 | 20 | 15 | 80°C, 5分钟 |
| FB02231002 | SnapDigest Esp3I | 37°C | 5 | 5 | 5 | 65°C, 10 分钟 |
| FB02253005 | SnapDigest FspBI | 37°C | 15 | 5 | 20 | 80°C, 5 分钟 |
| FB02205080 | SnapDigest HindIII | 37°C | 15 | 20 | 10 | 80°C, 10 分钟 |
| FB02258002 | SnapDigest KflI | 37°C | 5 | 5 | 10 | 否 (苯酚/氯仿提取，柱法纯化) |
| FB02232010 | SnapDigest Kpn2I | 37°C | 5 | 5 | 5 | 80°C, 5 分钟 |
| FB02206030 | SnapDigest KpnI | 37°C | 5 | 5 | 5 | 80°C, 5 分钟 |
| FB02245005 | SnapDigest KspAI | 37°C | 5 | 5 | 5 | 65°C, 20 分钟 |
| FB02255002 | SnapDigest LguI | 37°C | 5 | 5 | 5 | 65°C, 5 分钟 |
| FB02233010 | SnapDigest MluI | 37°C | 5 | 5 | 15 | 80°C, 5 分钟 |
| FB02235010 | SnapDigest Mph1103I | 37°C | 5 | 5 | 10 | 65°C, 15 分钟 |
| FB02249010 | SnapDigest MssI | 37°C | 5 | 5 | 5 | 65°C, 10 分钟 |
| FB02237005 | SnapDigest MunI | 37°C | 5 | 5 | 5 | 否 (苯酚/氯仿提取，柱法纯化) |
| FB02234010 | SnapDigest NcoI | 37°C | 10 | 10 | 5 | 65°C, 15 分钟 |
| FB02207030 | SnapDigest NdeI | 37°C | 5 | 60 | 30 | 65°C, 5 分钟 |
| FB02242010 | SnapDigest NheI | 37°C | 15 | 5 | 5 | 65°C, 5 分钟 |
| FB02208005 | SnapDigest NotI | 37°C | 30 | 5 | 10 | 80°C, 5 分钟 |
| FB02259002 | SnapDigest PacI | 37°C | 5 | 5 | 5 | 65°C, 10 分钟 |
| FB02209002 | SnapDigest PaeI | 37°C | 5 | 5 | 5 | 65°C, 5 分钟 |
| FB02239005 | SnapDigest Pfl23II | 37°C | 15 | 15 | 15 | 65°C, 5 分钟 |
| FB02210080 | SnapDigest PstI | 37°C | 5 | 30 | 5 | 否 (苯酚/氯仿提取，柱法纯化) |
| FB02257002 | SnapDigest PteI | 37°C | 5 | 5 | 5 | 80°C, 5 分钟 |
| FB02211002 | SnapDigest PvuI | 37°C | 15 | 5 | 5 | 80°C, 5 分钟 |
| FB02212040 | SnapDigest PvuII | 37°C | 15 | 5 | 5 | 否 (苯酚/氯仿提取，柱法纯化) |
| FB02217020 | SnapDigest SacI | 37°C | 15 | 30 | 10 | 65°C, 5 分钟 |
| FB02213020 | SnapDigest SalI | 37°C | 15 | 60 | 15 | 65°C, 10 分钟 |
| FB02230010 | SnapDigest ScaI | 37°C | 5 | 5 | 5 | 65°C, 10 分钟 |
| FB02246002 | SnapDigest SdaI | 37°C | 5 | 5 | 5 | 否 (苯酚/氯仿提取，柱法纯化) |
| FB02256010 | SnapDigest SfaAI | 37°C | 5 | 60 | 5 | 80°C, 5 分钟 |
| FB02219015 | SnapDigest SfiI | 50°C | 15 | 15 | 15 | 否 (苯酚/氯仿提取，柱法纯化) |
| FB02254010 | SnapDigest SgsI | 37°C | 5 | 5 | 5 | 65°C, 20 分钟 |
| FB02214020 | SnapDigest SmaI | 37°C | 5 | 5 | 5 | 65°C, 5 分钟 |
| FB02247020 | SnapDigest SmiI | 37°C | 20 | 30 | 30 | 65°C, 15 分钟 |
| FB02215030 | SnapDigest XbaI | 37°C | 5 | 5 | 10 | 65°C, 20 分钟 |
| FB02216040 | SnapDigest XhoI | 37°C | 5 | 5 | 10 | 80°C, 5 分钟 |
| FB02251002 | SnapDigest XmaJI | 37°C | 10 | 5 | 10 | 否 (苯酚/氯仿提取，柱法纯化) |
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仅供科研使用，不可用于诊断目的。