TruScript H Minus 反转录预混液

高效稳定的 cDNA 合成与 RT-qPCR 解决方案

Fisher Bioreagents TruScript 反转录预混液

TruScript™ 产品采用优化的 H Minus reverse transcriptase(H Minus 反转录酶)体系,兼顾热稳定性、持续合成能力与抑制剂耐受性,可实现高效、稳定的 cDNA 合成。

 

H Minus 设计缺乏 RNase H 活性,可减少 RNA 模板降解,从而提高 cDNA 完整性与长片段合成能力。该体系适用于复杂 RNA 二级结构、高 GC RNA、低丰度 RNA 及多种下游分子生物学应用,包括 RT-qPCR、RNA 病毒检测及转录组研究。

产品特点 (Key features)

  • 即用型预混液设计,简化操作流程并提高实验重复性
  • 支持42–60°C反转录条件,适用于复杂 RNA 二级结构与高 GC RNA 模板
  • 含 dNTPs、缓冲液及混合引物 (oligo (dT) 与随机引物
  • H Minus 反转录酶设计 (无 RNase H 活性),提高 cDNA 完整性
  • 提供含 DNase 版本,有效去除基因组 DNA (gDNA) 污染
  • 兼容不同 RNA 输入量范围,结果稳定可靠

选择适合您的 TruScript 反转录预混液

TruScript Core H Minus 反转录预混液
常规推荐款
TruScript Core H Minus 反转录预混液
TruScript Pro H Minus反转录预混液
TruScript Pro H Minus 反转录预混液
最佳反应温度 42℃ 50℃
最高反应温度 55℃ 60℃
反应时间 15 min 15 min
RT 失活时间 85℃, 5 min 85℃, 5 min
样本量线性范围 1 pg -1 µg 总 RNA 1 pg -2.5 µg 总 RNA
RNase H 活性
抑制剂耐受能力
适用场景
  • 常规 RT-qPCR
  • 常规基因表达分析
  • 日常 RNA 实验
  • 高 GC RNA
  • 复杂 RNA 二级结构

所有 TruScript 产品均采用 H Minus 设计(无 RNase H 活性),有助于提高 cDNA 完整性与产量。


什么是 H Minus 反转录酶?

H Minus reverse transcriptase(H Minus 反转录酶)是指缺乏 RNase H 活性的反转录酶。RNase H 活性会在 cDNA 合成过程中降解 RNA-DNA 杂交链中的 RNA 模板,从而可能影响 cDNA 的连续延伸与完整性。

 

相比传统反转录酶,H Minus 设计可在反转录过程中减少 RNA 模板降解,有助于提高反转录延伸效率及长片段 cDNA 的合成能力,从而提升:

  • cDNA 完整性与产量
  • 长片段 RNA 的反转录效率
  • 低丰度 RNA 的检测灵敏度
  • RT-qPCR 数据的稳定性与重复性

因此,H Minus 反转录酶广泛应用于高灵敏度 RT-qPCR、RNA 测序及低丰度 RNA 分析等分子生物学应用。


为什么选择含 DNase 的反转录预混液?

图1. 含 DNase 的 TruScript 反转录预混液可在反转录前有效去除残留基因组 DNA(gDNA),减少 RT-qPCR 中的非特异性扩增、Ct 值偏移及假阳性风险,从而提高检测特异性与数据可靠性。

RNA 样本中的残留基因组 DNA(gDNA)可能导致:

  • RT-qPCR 假阳性
  • 非特异扩增
  • Ct 值偏移
  • 数据重复性下降

TruScript 含 DNase 版本可在反转录前有效去除残留 gDNA,降低背景干扰,提高检测特异性,特别适用于:

  • 低表达基因
  • 高灵敏度 RT-qPCR
  • RNA 病毒检测

仅供科研使用,不可用于诊断目的。